филяриатоз

Устройство для экспресс-тестирования IgG/IgM на филяриатоз

Вкладыш в пакет

Образцы: цельная кровь/сыворотка/плазма

Дата вступления в силу: 2015-02

Только для профессионального использования в диагностике in vitro.

НАЗНАЧЕНИЕ

Экспресс-тест на филяриатоз IgG/IgM представляет собой иммуноанализ с латеральным потоком для одновременного обнаружения и дифференциации антилимфатических IgG и IgM филяриатозных паразитов (W. Bancrofti и B. Malayi) в сыворотке, плазме или цельной крови человека.Этот тест предназначен для использования в качестве скринингового теста и в качестве вспомогательного средства в

в  диагностика заражения лимфатическими филяриатозными паразитами.Любой реактивный образец с экспресс-тестом на филяриатоз IgG/IgM должен быть подтвержден альтернативным(и) методом(ами) тестирования.

Лимфатический филяриатоз, известный как слоновая болезнь, в основном вызываемый W. bancrofti и B. malayi, поражает около 120 миллионов человек в 80 странах1,2.Болезнь передается человеку через укусы инфицированных комаров, в которых развиваются микрофларии, высосанные из инфицированного человека.

в личинки третьей стадии.Как правило, для установления заражения человека требуется повторное и длительное воздействие инфицированных личинок.

Окончательным паразитологическим диагнозом является выявление микрофлариев в образцах крови3.Однако этот золотой стандарт теста ограничен требованием ночного сбора крови и

недостаток  достаточной чувствительности.Обнаружение циркулирующих антигенов коммерчески доступно.Его полезность для W. bancrofti4 ограничена.Кроме того, микрофиляремия и антигенемия развиваются через несколько месяцев или лет после воздействия.

Обнаружение антител обеспечивает ранние средства для выявления заражения филяриатозным паразитом.Присутствие IgM к антигенам паразита указывает на текущую инфекцию, тогда как IgG соответствует поздней стадии инфекции или перенесенной инфекции5.Кроме того, идентификация консервативных антигенов позволяет применять тест на панфилярию.Использование рекомбинантных белков исключает перекрестную реакцию у людей с

другие паразитарные заболевания6.В экспресс-тесте на филяриатоз IgG/IgM используются консервативные рекомбинантные антигены для одновременного обнаружения IgG.  и IgM к паразитам W. bancrofti и B. malayi без ограничений на сбор образцов.

Экспресс-тест на филяриатоз IgG/IgM представляет собой хроматографический иммуноанализ с латеральным потоком.Тест-кассета состоит из: 1) прокладки конъюгата бордового цвета, содержащей рекомбинантные общие антигены W. bancrofti и B. malayi, конъюгированные с коллоидным золотом (конъюгаты филяриатоза) и конъюгаты IgG кролика с золотом, 2) полоски нитроцеллюлозной мембраны, содержащей две тест-полоски ( полосы T1 и T2) и контрольная полоса (C  группа).Полоса T1 предварительно покрыта моноклональными античеловеческими IgM для обнаружения  IgM против W. bancrofti и B. malayi, полоса T2 предварительно покрыта реагентами для обнаружения IgG против W. bancrofti и B. malayi, а полоса C предварительно покрыта козьим антикроличьим IgG.

Когда достаточный объем испытуемого образца подается в лунку для образца кассеты, образец мигрирует по кассете под действием капиллярных сил.IgM-антитела W. bancrofti или B. malayi, если они присутствуют в образце, будут связываться с конъюгатами филяриатоза.Иммунокомплекс – это  затем захватываются мембраной предварительно покрытыми антителами против IgM человека, образуя полосу Т2 бордового цвета, что указывает на положительный результат теста на IgM W. bancrofti или B. malayi.

IgG-антитела W. bancrofti или B. malayi, если они присутствуют в образце, будут связываться с конъюгатами филяриатоза.Затем иммунокомплекс захватывается реагентами, предварительно нанесенными на мембрану, образуя полосу T1 бордового цвета, что указывает на положительный результат теста IgG W. bancrofti или B. malayi.Отсутствие  любых тестовых полос (T1 и T2) предполагает отрицательный результат.Тест содержит внутренний контроль (полоса C), который должен демонстрировать бордовую полосу иммунокомплекса конъюгата козьего антикроличьего IgG/кроличьего IgG-золота независимо от развития окраски на любой из тестируемых полос.В противном случае результат теста недействителен, и образец должен быть повторно протестирован с другим устройством.

Каждое устройство содержит полоску с цветными конъюгатами.

Индивидуально упакованные тестовые устройства и реактивы, предварительно нанесенные на

соответствующие регионы

Одноразовые пипетки  Для добавления образцов используйте

Буфер   Фосфатно-солевой буфер и консервант

вкладыш в пакет  Для инструкции по эксплуатации

ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ

Хранить в запечатанном пакете при комнатной температуре или в холодильнике (2-30°C).Тестовое устройство стабильно в течение срока годности, указанного на запечатанном пакете.Тестовое устройство должно оставаться в запечатанной упаковке до момента использования.Не замораживать.Не используйте по истечении срока годности.

Только для профессионального использования в диагностике in vitro.

 Не использовать после истечения срока годности, указанного на упаковке.Не используйте тест, если его пакет из фольги поврежден.

поврежден.Не используйте повторно тесты.

  Этот набор содержит продукты животного происхождения.Сертифицированное знание происхождения и/или санитарных

состояние животных не гарантирует полного отсутствия трансмиссивных патогенных агентов.Это  поэтому рекомендуется рассматривать эти продукты как потенциально инфекционные и обращаться с ними с соблюдением обычных мер предосторожности (не глотать и не вдыхать).

  Избегайте перекрестного загрязнения образцов, используя новый контейнер для сбора образцов для каждого

получен образец.

Внимательно прочитайте всю процедуру перед выполнением каких-либо тестов.

 Не ешьте, не пейте и не курите в месте, где работают с образцами и наборами.Обработать все

образцы  как если бы они содержали инфекционные агенты.Соблюдайте установленные меры предосторожности против микробиологических опасностей на протяжении всей процедуры и следуйте стандартным процедурам надлежащей утилизации образцов.Носите защитную одежду, такую ​​как лабораторные халаты, одноразовые перчатки и защитные очки, когда исследуете образцы.

Не меняйте местами и не смешивайте реагенты из разных партий.

Влажность и температура могут негативно сказаться на результатах.

СБОР ОБРАЗЦОВ И ОБРАБОТКА

1. Экспресс-тест на филяриатоз IgG/IgM можно проводить на цельной крови/сыворотке/плазме.

2. Собрать целиком  образцы крови, сыворотки или плазмы в соответствии с обычными клиническими лабораторными процедурами.

3. Тестирование следует проводить сразу же после сбора образцов.Не оставляйте образцы при комнатной температуре на длительное время.Для длительного хранения образцы должны храниться при температуре ниже -20°С.Цельную кровь следует хранить при температуре 2-8°C, если тест должен быть выполнен в течение 2 дней после сбора.Не замораживайте образцы цельной крови.

4. Перед испытанием доведите образцы до комнатной температуры.Перед испытанием замороженные образцы необходимо полностью разморозить и хорошо перемешать.Образцы не следует замораживать и размораживать повторно.

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА

1. Доведите образец и испытуемые компоненты до комнатной температуры.Поместите тестовое устройство на чистую ровную поверхность.

2. Наполните пипетку образцом.Нанесите 1 каплю образца (цельной крови, плазмы или сыворотки) в лунку для образца, затем сразу же добавьте 1 каплю (около 35-50 мкл) разбавителя образца.Установите таймер.

3. Результаты можно прочитать через 15 минут.Не читайте результат через 15 минут.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ:

C

Т1

Т2

C

Т1

Т2

Т1

Т2

*ПРИМЕЧАНИЕ. Интенсивность цвета в области (областях) тестовой линии будет варьироваться в зависимости от концентрации антител к филяриатозу в образце.Следовательно, любой оттенок цвета в области (областях) тестовой линии следует считать положительным.

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ:

C

Т1

Т2

Используя отдельные кассеты экспресс-теста на филяриатоз IgG/IgM, как описано выше в процедуре анализа, выполните 1 положительный контроль.  и 1 отрицательный контроль (предоставляется по запросу) при следующих обстоятельствах для контроля эффективности теста:

1. Новый оператор использует комплект перед проведением испытаний образцов.

2.  Используется новый тестовый набор.

3.  Используется новая партия комплектов.

4.  Температура, используемая во время хранения набора, выходит за пределы 2°C-30°C.

5. Температура испытательного участка выходит за пределы 15°C-30°C.

1. Клиническая эффективность для теста IgM

24 образца от пациентов с острым лимфатическим филяриатозом и 200 образцов, взятых из региона, не пораженного филяриатозом, были протестированы с помощью экспресс-теста на филяриатоз IgG/IgM.

Сравнение по всем предметам показано в следующей таблице:

Относительная чувствительность: 95,8%;Относительная специфичность: 100%;Общее согласие: 99,6%

2. Клиническая эффективность для теста IgG

26 образцов от пациентов с хроническим лимфатическим филяриатозом и 200 образцов, взятых из региона, не пораженного филяриатозом, были протестированы с помощью экспресс-теста на филяриатоз IgG/IgM.Сравнение по всем предметам показано в следующей таблице:

Относительная чувствительность: 92,3%;Относительная специфичность: 100%;Общее согласие: 99,1%

1. Процедура анализа и интерпретация результатов теста должны строго соблюдаться при тестировании на наличие антител к филяриатозным паразитам в сыворотке, плазме или цельной крови отдельных субъектов.Несоблюдение процедуры может привести к неточным результатам.

2.  Экспресс-тест на филяриатоз IgG/IgM ограничивается качественным определением антител к W. bancrofti и B. malayi в сыворотке, плазме или цельной крови человека.Интенсивность тестовой полосы не имеет линейной корреляции с титром антител в образце.

3. Отрицательный результат для отдельного субъекта указывает на отсутствие обнаруживаемых антител к W. bancrofti и B. malayi.Однако отрицательный результат теста не исключает возможности контакта с W. bancrofti и B. malayi.

4. Отрицательный результат может быть получен, если количество антител к W. bancrofti и B. malayi, присутствующих в образце, ниже пределов обнаружения анализа, или обнаруженные антитела отсутствуют на той стадии заболевания, на которой образец собирается.

5. Некоторые образцы, содержащие необычно высокий титр гетерофильных антител или ревматоидного фактора, могут повлиять на ожидаемые результаты.

6. Результаты, полученные с помощью этого теста, следует интерпретировать только в сочетании с другими диагностическими процедурами и клиническими данными.

1. Лимфатический филяриатоз: болезнь и борьба с ней.Пятый доклад Комитета экспертов ВОЗ по филяриатозу.технический представитель ВОЗ, сер. 1992 г.;281-871.

2. Майкл Э., Банди Д.П., Гренфелл Б.Т.Переоценка глобальной распространенности и распространения лимфатического филяриатоза.Паразитология 1996;112:405-428.

3. Эберхард М.Л., Ламми П.Дж.Лабораторная диагностика филяриатоза.клин.Лаборатория Мед 1991;11:977‐ 1010.

4. Еще С.Дж., Копман Д.Б.Высокоспецифичный и чувствительный ИФА на основе моноклональных антител для обнаружения циркулирующего антигена при банкрофтовом филяриатозе.Троп Мед Паразитол 1990;41:403-406

5. Ламми  PJ, Weil G, et al: Рекомбинантные анализы антител на основе антигена для надзора за диагнозом лимфатического филяриатоза – многоцентровое исследование.Flaria Jornal 2004: 3: 9-18.